AAT – Trampa de Aminoácidos
- Atrapamiento eficaz de aminoácidos/pequeños péptidos
- Fácil instalación, como precolumna
- Columna de 4 x 50 mm, resina de 5 µm
En el análisis composicional de los monosacáridos de las glicoproteínas mediante HPAEC-PAD, la presencia de aminoácidos y pequeños péptidos puede interferir en la cuantificación de los analitos de interés.
Estos aminoácidos y pequeños péptidos se generan durante la hidrólisis ácida de las glicoproteínas para liberar los monosacáridos del esqueleto proteico.
Si la concentración de aminoácidos, en particular de lisina y glutamina, es suficientemente alta en comparación con la de los monosacáridos liberados, interferirán en la cuantificación de los monosacáridos debido a la coelución.
Además, los aminoácidos se eliminan de forma menos eficaz de la superficie del electrodo de Au debido a la forma de onda de potencial subóptima aplicada para la detección de monosacáridos, lo que podría provocar el ensuciamiento y la pérdida de respuesta.
Para eliminar la interferencia de los aminoácidos y asegurar un rendimiento óptimo de tu análisis de monosacáridos mediante HPAEC-PAD, Antec Scientific introduce una columna trampa de aminoácidos.
La columna trampa de aminoácidos se basa en una novedosa resina polimérica monodispersa de 5 µm funcionalizada con grupos activos que atrapan o retrasan temporalmente la elución de aminoácidos y péptidos pequeños en las condiciones de separación (10 – 20 mM de NaOH) utilizadas en el análisis de monosacáridos HPAEC-PAD.
Posteriormente, los aminoácidos atrapados se eluyen durante el paso de lavado/regeneración a pH elevado (normalmente 100 – 200 mM de NaOH), sin ensuciar la superficie del electrodo de trabajo de Au.
El rendimiento de la trampa de aminoácidos se demuestra en la figura 1.
Se inyectó una mezcla de 6 monosacáridos y 4 estándares de aminoácidos en una columna SweetSep™ AEX20 con y sin columna trampa.
Sin trampa de aminoácidos en el sistema, en particular la lisina y la glutamina, coeluyen con los monosacáridos de interés.
Es evidente que con la columna trampa de aminoácidos se elimina eficazmente el problema de la coelución de los aminoácidos.
Fig. 1. Análisis de hidratos de carbono con y sin trampa de aminoácidos SweetSep™.
Los picos interferentes de lisina y glutamina ya no son un problema en el cromatograma superior.
Condiciones: separación en columna SweetSep™ AEX20 utilizando un eluyente de NaOH 20 mM (30°C, 0,7 mL/min).
La columna trampa de aminoácidos se utiliza como precolumna.
Muestra inyectada: 10 µL de patrones en agua desionizada de 10 µM de monosacáridos (fucosa, galactosamina, glucosamina, galactosa, glucosa y manosa) y 1 mM de aminoácidos (arginina, lisina y glutamina).
Arriba (rojo): con trampa de aminoácidos; Abajo (negro): sin trampa de aminoácidos.
Aminoácidos marcados en rojo.