Détection électrochimique pour HPLC
Qu’est-ce que la détection électrochimique ?
La détection électrochimique (DCE) pour HPLC ou uHPLC est une technique de détection sélective et extrêmement sensible qui est appliquée dans un certain nombre d’analyses telles que les neurotransmetteurs, les catécholamines, les aminoglycosides, les glucides, les thiols et les phénols. Pour la détection, on utilise des cellules à écoulement et des électrodes qui peuvent être miniaturisées, ce qui permet de l’adapter à la HPLC standard ou nanométrique. En combinaison avec l’électronique appropriée, l’ECD a une énorme gamme dynamique linéaire de plus de 7 ordres de grandeur. Cela signifie que les concentrations peuvent être mesurées linéairement de 10 pmole/L à 100 µmol/L avec le même instrument.
HPLC avec un détecteur électrochimique.
Comment fonctionne la détection électrochimique ?
Dans la détection électrochimique ampérométrique, on mesure le courant électrique résultant des réactions d’oxydation ou de réduction (voir vidéo). Un échantillon est introduit dans la HPLC et séparé sur la colonne chromatographique. La colonne est connectée à une cellule ECD, qui est un capteur électrochimique où une réaction a lieu au niveau d’une électrode. Les substances électrochimiquement actives qui éluent de la colonne subissent une réaction électrochimique, les électrons sont transférés et il en résulte un courant électrique. Les électrodes sont connectées à un circuit électronique doté d’un puissant amplificateur à faible bruit qui convertit un courant de l’ordre du pico- ou du nanoampère en un signal détectable pour l’acquisition de données.
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HPLC/EDC expliqué en 2 min. (double-cliquez pour agrandir). La version complète se trouve ailleurs sur ce site et sur YouTube.