{"id":15371,"date":"2021-10-10T13:52:06","date_gmt":"2021-10-10T13:52:06","guid":{"rendered":"https:\/\/antecscientific.com\/tecnicas\/que-es-la-hplc\/"},"modified":"2023-01-09T12:33:43","modified_gmt":"2023-01-09T12:33:43","slug":"que-es-la-hplc","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/antecscientific.com\/es\/productos\/tecnicas\/que-es-la-hplc\/","title":{"rendered":"\u00bfQu\u00e9 es la HPLC?"},"content":{"rendered":"<p>[et_pb_section fb_built=\u00bb1&#8243; admin_label=\u00bbHeader\u00bb _builder_version=\u00bb4.11.1&#8243; background_image=\u00bbhttps:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2020\/10\/Antec_technique_1_2.jpg\u00bb parallax=\u00bbon\u00bb custom_padding=\u00bb2vw|0px|200px|0px|false|false\u00bb collapsed=\u00bbon\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][et_pb_row _builder_version=\u00bb3.25&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][et_pb_column type=\u00bb4_4&#8243; _builder_version=\u00bb3.25&#8243; custom_padding=\u00bb|||\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb custom_padding__hover=\u00bb|||\u00bb][et_pb_text admin_label=\u00bbBreadcrumbs (don&#8217;t touch)\u00bb _builder_version=\u00bb4.4.8&#8243; 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Puede aplicarse para medir la concentraci\u00f3n de hidratos de carbono en alimentos y bebidas, pesticidas en aguas superficiales para an\u00e1lisis medioambientales o catecolaminas en orina con fines cl\u00ednicos, por citar algunos ejemplos.<\/p>\n<p>La UHPLC (U significa \u00abultra\u00bb) se basa en el mismo principio, s\u00f3lo que se aplican columnas cromatogr\u00e1ficas m\u00e1s nuevas y eficaces. Las columnas de UHPLC se rellenan con part\u00edculas m\u00e1s peque\u00f1as con un mejor rendimiento de separaci\u00f3n. Debido a la estrechez de los canales entre las part\u00edculas peque\u00f1as, la presi\u00f3n en dicho sistema es mayor. Por eso, a menudo se necesitan instrumentos especiales.<\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][et_pb_column type=\u00bb1_3&#8243; _builder_version=\u00bb4.4.8&#8243; custom_padding=\u00bb5%|5%|||false|false\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb custom_padding__hover=\u00bb|||\u00bb][et_pb_image src=\u00bbhttps:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2020\/11\/ALEXYS-front-dark-scaled.jpg\u00bb title_text=\u00bbALEXYS frontal oscuro\u00bb _builder_version=\u00bb4.11.2&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][\/et_pb_image][et_pb_text admin_label=\u00bbimage explanation\u00bb _builder_version=\u00bb4.11.3&#8243; text_font=\u00bb||||||||\u00bb text_font_size=\u00bb13px\u00bb text_line_height=\u00bb2em\u00bb header_font=\u00bb||||||||\u00bb header_2_font=\u00bbRaleway|700|||||||\u00bb header_2_font_size=\u00bb50px\u00bb header_2_line_height=\u00bb1.4em\u00bb header_6_font=\u00bbRaleway|700||on|||||\u00bb header_6_font_size=\u00bb16px\u00bb header_6_letter_spacing=\u00bb5px\u00bb header_6_line_height=\u00bb1.8em\u00bb max_width=\u00bb700px\u00bb module_alignment=\u00bbcenter\u00bb header_2_font_size_tablet=\u00bb35px\u00bb header_2_font_size_phone=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb]<\/p>\n<p><em>Un sistema HPLC con, a la izquierda, una bomba con botellas de fase m\u00f3vil, un automuestreador y un detector (derecha).<br \/><\/em><\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][\/et_pb_row][et_pb_row custom_padding_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb admin_label=\u00bbL\u00ednea divisoria\u00bb _builder_version=\u00bb4.5.6&#8243; width=\u00bbauto\u00bb max_width=\u00bbnone\u00bb custom_padding=\u00bb|0px|||false|false\u00bb custom_padding_tablet=\u00bb\u00bb custom_padding_phone=\u00bb|10%|||false|false\u00bb collapsed=\u00bbon\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][et_pb_column type=\u00bb4_4&#8243; _builder_version=\u00bb4.4.8&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][et_pb_divider color=\u00bb#dee1e6&#8243; _builder_version=\u00bb4.4.8&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][\/et_pb_divider][\/et_pb_column][\/et_pb_row][et_pb_row column_structure=\u00bb2_3,1_3&#8243; custom_padding_last_edited=\u00bboff|desktop\u00bb _builder_version=\u00bb4.5.6&#8243; width=\u00bbauto\u00bb max_width=\u00bbnone\u00bb custom_padding=\u00bb27px|0|27px|0px|false|false\u00bb custom_padding_tablet=\u00bb|0px||0px||true\u00bb locked=\u00bboff\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][et_pb_column type=\u00bb2_3&#8243; _builder_version=\u00bb3.25&#8243; custom_padding=\u00bb|||\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb custom_padding__hover=\u00bb|||\u00bb][et_pb_text admin_label=\u00bbSubtitle\u00bb _builder_version=\u00bb4.11.3&#8243; text_font=\u00bb||||||||\u00bb text_font_size=\u00bb16px\u00bb text_line_height=\u00bb2em\u00bb header_font=\u00bb||||||||\u00bb header_2_font=\u00bb|600||on|||||\u00bb header_2_text_color=\u00bb#df0834&#8243; header_2_font_size=\u00bb20px\u00bb header_2_line_height=\u00bb1.4em\u00bb header_6_font=\u00bb|700||on|||||\u00bb header_6_font_size=\u00bb16px\u00bb header_6_letter_spacing=\u00bb5px\u00bb header_6_line_height=\u00bb1.8em\u00bb max_width=\u00bb700px\u00bb module_alignment=\u00bbcenter\u00bb custom_margin=\u00bb||0px||false|false\u00bb custom_padding=\u00bb||0px||false|false\u00bb header_2_font_size_tablet=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_phone=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb]<\/p>\n<h2>\u00bfC\u00f3mo funciona la HPLC?<\/h2>\n<p>[\/et_pb_text][et_pb_text admin_label=\u00bbParagraph\u00bb _builder_version=\u00bb4.11.3&#8243; text_font=\u00bb||||||||\u00bb text_font_size=\u00bb18px\u00bb text_line_height=\u00bb2em\u00bb header_font=\u00bb||||||||\u00bb header_2_font=\u00bbRaleway|700|||||||\u00bb header_2_font_size=\u00bb50px\u00bb header_2_line_height=\u00bb1.4em\u00bb header_6_font=\u00bbRaleway|700||on|||||\u00bb header_6_font_size=\u00bb16px\u00bb header_6_letter_spacing=\u00bb5px\u00bb header_6_line_height=\u00bb1.8em\u00bb text_orientation=\u00bbjustified\u00bb max_width=\u00bb700px\u00bb module_alignment=\u00bbcenter\u00bb custom_margin=\u00bb0px||||false|false\u00bb custom_padding=\u00bb0px||||false|false\u00bb hover_enabled=\u00bb0&#8243; header_2_font_size_tablet=\u00bb35px\u00bb header_2_font_size_phone=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb sticky_enabled=\u00bb0&#8243;]<\/p>\n<p>Un sistema HPLC consta de una o varias bombas, un automuestreador, un detector y un software de adquisici\u00f3n de datos. En el coraz\u00f3n del sistema HPLC hay una columna cromatogr\u00e1fica, llena de part\u00edculas de fase estacionaria, donde tiene lugar la separaci\u00f3n de las sustancias de una mezcla. Los instrumentos est\u00e1n conectados mediante tubos, denominados conductos de flujo. La(s) bomba(s) suministra(n) una soluci\u00f3n portadora, o fase m\u00f3vil, a trav\u00e9s de la trayectoria de flujo del sistema. La muestra que se va a analizar se introduce en la v\u00eda de flujo mediante un automuestreador. Normalmente, el caudal en la mayor\u00eda de los HPLC est\u00e1 entre 0,05 &#8211; 2 mL\/min. La presi\u00f3n en el sistema depende sobre todo del tama\u00f1o de las part\u00edculas de la fase estacionaria, de la longitud de la columna y del caudal. Las presiones t\u00edpicas en HPLC son de 100 a 400 bares.<\/p>\n<p>El principio de separaci\u00f3n en HPLC se basa en la distribuci\u00f3n del analito entre la fase estacionaria (columna llena de part\u00edculas) y la fase m\u00f3vil (disolvente que fluye a trav\u00e9s). En un sistema HPLC que funcione correctamente, el tiempo de permanencia en la columna es \u00fanico para cada sustancia de la mezcla. Este \u00abtiempo de retenci\u00f3n\u00bb identifica la sustancia. En la cromatograf\u00eda de fase inversa se utilizan part\u00edculas de fase estacionaria no polares. Como resultado, las sustancias menos polares tienen una interacci\u00f3n m\u00e1s fuerte y pasan m\u00e1s tiempo en la columna que las sustancias polares.<\/p>\n<p>El detector mide continuamente la fase m\u00f3vil que fluye a trav\u00e9s de la c\u00e9lula de detecci\u00f3n. Las sustancias que eluyen de la columna provocan una desviaci\u00f3n de la se\u00f1al, en forma de pico gaussiano. La se\u00f1al se almacena y se analiza en un cromatograma mediante un software de adquisici\u00f3n de datos en un PC que est\u00e1 conectado al detector.<\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][et_pb_column type=\u00bb1_3&#8243; _builder_version=\u00bb4.4.8&#8243; custom_padding=\u00bb5%|5%|||false|false\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb custom_padding__hover=\u00bb|||\u00bb][et_pb_image src=\u00bbhttps:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/09\/hplc1.jpg\u00bb title_text=\u00bbhplc1&#8243; _builder_version=\u00bb4.10.5&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][\/et_pb_image][et_pb_text admin_label=\u00bbimage explanation\u00bb _builder_version=\u00bb4.10.5&#8243; text_font=\u00bb||||||||\u00bb text_font_size=\u00bb13px\u00bb text_line_height=\u00bb2em\u00bb header_font=\u00bb||||||||\u00bb header_2_font=\u00bbRaleway|700|||||||\u00bb header_2_font_size=\u00bb50px\u00bb header_2_line_height=\u00bb1.4em\u00bb header_6_font=\u00bbRaleway|700||on|||||\u00bb header_6_font_size=\u00bb16px\u00bb header_6_letter_spacing=\u00bb5px\u00bb header_6_line_height=\u00bb1.8em\u00bb max_width=\u00bb700px\u00bb module_alignment=\u00bbcenter\u00bb header_2_font_size_tablet=\u00bb35px\u00bb header_2_font_size_phone=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb]<\/p>\n<p><em>Configuraci\u00f3n esquem\u00e1tica de HPLC, la v\u00e1lvula de inyecci\u00f3n forma parte de un automuestreador.<br \/><\/em><\/p>\n<p>[\/et_pb_text][et_pb_image src=\u00bbhttps:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/09\/chrom1.jpg\u00bb title_text=\u00bbcrom1&#8243; _builder_version=\u00bb4.10.5&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][\/et_pb_image][et_pb_text admin_label=\u00bbimage explanation\u00bb _builder_version=\u00bb4.11.2&#8243; text_font=\u00bb||||||||\u00bb text_font_size=\u00bb13px\u00bb text_line_height=\u00bb2em\u00bb header_font=\u00bb||||||||\u00bb header_2_font=\u00bbRaleway|700|||||||\u00bb header_2_font_size=\u00bb50px\u00bb header_2_line_height=\u00bb1.4em\u00bb header_6_font=\u00bbRaleway|700||on|||||\u00bb header_6_font_size=\u00bb16px\u00bb header_6_letter_spacing=\u00bb5px\u00bb header_6_line_height=\u00bb1.8em\u00bb max_width=\u00bb700px\u00bb module_alignment=\u00bbcenter\u00bb header_2_font_size_tablet=\u00bb35px\u00bb header_2_font_size_phone=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb]<\/p>\n<p><em>Tres instant\u00e1neas en el tiempo mientras una mezcla es transportada a trav\u00e9s de una columna. Al principio (izquierda), no hay separaci\u00f3n. Cuando el tap\u00f3n de muestra se desplaza m\u00e1s abajo en el recorrido del flujo, las sustancias (\u2206 y \u25cf) se separan.<\/em><\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][\/et_pb_row][et_pb_row custom_padding_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb admin_label=\u00bbL\u00ednea divisoria\u00bb _builder_version=\u00bb4.5.6&#8243; width=\u00bbauto\u00bb max_width=\u00bbnone\u00bb custom_padding=\u00bb|0px|||false|false\u00bb custom_padding_tablet=\u00bb\u00bb custom_padding_phone=\u00bb|10%|||false|false\u00bb collapsed=\u00bbon\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][et_pb_column type=\u00bb4_4&#8243; _builder_version=\u00bb4.4.8&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][et_pb_divider color=\u00bb#dee1e6&#8243; _builder_version=\u00bb4.4.8&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][\/et_pb_divider][\/et_pb_column][\/et_pb_row][et_pb_row column_structure=\u00bb2_3,1_3&#8243; custom_padding_last_edited=\u00bboff|desktop\u00bb _builder_version=\u00bb4.5.6&#8243; width=\u00bbauto\u00bb max_width=\u00bbnone\u00bb custom_padding=\u00bb27px|0|27px|0px|false|false\u00bb custom_padding_tablet=\u00bb|0px||0px||true\u00bb locked=\u00bboff\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][et_pb_column type=\u00bb2_3&#8243; _builder_version=\u00bb3.25&#8243; custom_padding=\u00bb|||\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb custom_padding__hover=\u00bb|||\u00bb][et_pb_text admin_label=\u00bbSubtitle\u00bb _builder_version=\u00bb4.10.5&#8243; text_font=\u00bb||||||||\u00bb text_font_size=\u00bb16px\u00bb text_line_height=\u00bb2em\u00bb header_font=\u00bb||||||||\u00bb header_2_font=\u00bb|600||on|||||\u00bb header_2_text_color=\u00bb#df0834&#8243; header_2_font_size=\u00bb20px\u00bb header_2_line_height=\u00bb1.4em\u00bb header_6_font=\u00bb|700||on|||||\u00bb header_6_font_size=\u00bb16px\u00bb header_6_letter_spacing=\u00bb5px\u00bb header_6_line_height=\u00bb1.8em\u00bb max_width=\u00bb700px\u00bb module_alignment=\u00bbcenter\u00bb custom_margin=\u00bb||0px||false|false\u00bb custom_padding=\u00bb||0px||false|false\u00bb header_2_font_size_tablet=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_phone=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb]<\/p>\n<h2>\u00bfQu\u00e9 es un cromatograma?<\/h2>\n<p>[\/et_pb_text][et_pb_text admin_label=\u00bbParagraph\u00bb _builder_version=\u00bb4.11.3&#8243; text_font=\u00bb||||||||\u00bb text_font_size=\u00bb18px\u00bb text_line_height=\u00bb2em\u00bb header_font=\u00bb||||||||\u00bb header_2_font=\u00bbRaleway|700|||||||\u00bb header_2_font_size=\u00bb50px\u00bb header_2_line_height=\u00bb1.4em\u00bb header_6_font=\u00bbRaleway|700||on|||||\u00bb header_6_font_size=\u00bb16px\u00bb header_6_letter_spacing=\u00bb5px\u00bb header_6_line_height=\u00bb1.8em\u00bb text_orientation=\u00bbjustified\u00bb max_width=\u00bb700px\u00bb module_alignment=\u00bbcenter\u00bb custom_margin=\u00bb0px||||false|false\u00bb custom_padding=\u00bb0px||||false|false\u00bb header_2_font_size_tablet=\u00bb35px\u00bb header_2_font_size_phone=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb]<\/p>\n<p>Un cromatograma es un gr\u00e1fico que contiene los datos recogidos de un detector de HPLC por el software de adquisici\u00f3n de datos. Los datos se almacenan en un archivo, que contiene la se\u00f1al y el tiempo de retenci\u00f3n de una corrida cromatogr\u00e1fica. A menudo se obtienen en una secuencia un mont\u00f3n de cromatogramas que contienen los an\u00e1lisis de las muestras y los patrones para la calibraci\u00f3n. Esta informaci\u00f3n se utiliza para la identificaci\u00f3n y cuantificaci\u00f3n, el objetivo \u00faltimo del an\u00e1lisis. Utilizando patrones de calibraci\u00f3n, la altura de la se\u00f1al se relaciona con la concentraci\u00f3n y el tiempo de retenci\u00f3n identifica una sustancia en muestras desconocidas.<\/p>\n<p>Debe tenerse cuidado de que el pico medido en el cromatograma de la muestra no coeluya con otras sustancias con el mismo tiempo de retenci\u00f3n. Esta y otras comprobaciones forman parte de la validaci\u00f3n de un ensayo.<\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][et_pb_column type=\u00bb1_3&#8243; _builder_version=\u00bb4.4.8&#8243; custom_padding=\u00bb5%|5%|||false|false\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb custom_padding__hover=\u00bb|||\u00bb][et_pb_image src=\u00bbhttps:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2020\/07\/ma_5min_sm2.png\u00bb title_text=\u00bbma_5min_sm2&#8243; _builder_version=\u00bb4.10.5&#8243; global_colors_info=\u00bb{}\u00bb][\/et_pb_image][et_pb_text admin_label=\u00bbimage explanation\u00bb _builder_version=\u00bb4.10.5&#8243; text_font=\u00bb||||||||\u00bb text_font_size=\u00bb13px\u00bb text_line_height=\u00bb2em\u00bb header_font=\u00bb||||||||\u00bb header_2_font=\u00bbRaleway|700|||||||\u00bb header_2_font_size=\u00bb50px\u00bb header_2_line_height=\u00bb1.4em\u00bb header_6_font=\u00bbRaleway|700||on|||||\u00bb header_6_font_size=\u00bb16px\u00bb header_6_letter_spacing=\u00bb5px\u00bb header_6_line_height=\u00bb1.8em\u00bb max_width=\u00bb700px\u00bb module_alignment=\u00bbcenter\u00bb header_2_font_size_tablet=\u00bb35px\u00bb header_2_font_size_phone=\u00bb25px\u00bb header_2_font_size_last_edited=\u00bbon|phone\u00bb global_colors_info=\u00bb{}\u00bb]<\/p>\n<p><em>Cromatograma con patrones de calibraci\u00f3n de varios neurotransmisores.<\/em><\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][\/et_pb_row][\/et_pb_section]<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>\u00bfQu\u00e9 es la HPLC?La HPLC o cromatograf\u00eda l\u00edquida de alta resoluci\u00f3n es una t\u00e9cnica anal\u00edtica para identificar y cuantificar sustancias en una soluci\u00f3n. Puede aplicarse para medir la concentraci\u00f3n de hidratos de carbono en alimentos y bebidas, pesticidas en aguas superficiales para an\u00e1lisis medioambientales o catecolaminas en orina con fines cl\u00ednicos, por citar algunos ejemplos. 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