{"id":12893,"date":"2021-10-02T18:40:24","date_gmt":"2021-10-02T18:40:24","guid":{"rendered":"https:\/\/antecscientific.com\/reduktion-der-disulfidbindung\/reduktion-der-disulfidbindung-in-proteinen\/"},"modified":"2022-11-22T09:04:57","modified_gmt":"2022-11-22T09:04:57","slug":"reduktion-der-disulfidbindung-in-proteinen","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/antecscientific.com\/de\/applikationen\/roxy-reaktoren\/reduktion-der-disulfidbindung\/reduktion-der-disulfidbindung-in-proteinen\/","title":{"rendered":"Reduktion der Disulfidbindung in Proteinen"},"content":{"rendered":"<p>[et_pb_section fb_built=&#8220;1&#8243; admin_label=&#8220;Header&#8220; _builder_version=&#8220;4.6.6&#8243; background_image=&#8220;https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2020\/10\/application_disulfide.jpg&#8220; parallax=&#8220;on&#8220; width=&#8220;100%&#8220; custom_padding=&#8220;2vw|0px|200px|0px|false|false&#8220; collapsed=&#8220;on&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;][et_pb_row _builder_version=&#8220;4.5.8&#8243; 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Sie stabilisieren die 3D-Struktur des Proteins und sind entscheidend f\u00fcr dessen biologische Funktion. Die Reduktion von intra- und intermolekularen Disulfidbindungen ist f\u00fcr eine erfolgreiche Charakterisierung und Zuordnung der Bindungsstellen durch MS erforderlich. Die Offline-Reduktion erfolgt mit hochkonzentrierten chemischen Mitteln, z <em>.<\/em> B. Dithiothreitol (DTT), das vor der LC\/MS-Analyse entfernt werden muss. Alternativ k\u00f6nnen auch thiolfreie Reduktionsmittel wie TCEP (Tris(2-carboxyethyl)phosphin) verwendet werden. Die Probenvorbereitung ist jedoch nach wie vor aufw\u00e4ndig und l\u00e4sst sich nur schwer mit der Online-LC\/MS kombinieren. Dar\u00fcber hinaus kann die M\u00f6glichkeit der Online-Reduktion von Disulfidbindungen f\u00fcr die Bestimmung von Disulfidbindungsanordnungen oder f\u00fcr die Top-Down-Proteomics-Strategie von Vorteil sein, die auf der Fragmentierung intakter Proteine ohne enzymatischen Verdau beruht.<\/p>\n<p>Schlie\u00dflich zeigt die Verwendung von (LC)\/EC\/MS gro\u00dfes Potenzial f\u00fcr die schnelle Zuordnung von S-S-Bindungen in Biopharmazeutika. Das ROXY EC- und ROXY EC\/LC-System mit seinen propriet\u00e4ren Elektroden auf Titanbasis sind die idealen Instrumente zur Durchf\u00fchrung solcher Studien.<\/p>\n<p><strong>Elektrochemisch unterst\u00fctzte Reduktion von Disulfidbindungen in Insulin<\/strong><\/p>\n<p>Insulin, ein kleines Protein von 5733 Da, wird als Modellverbindung f\u00fcr die S-S-Reduktion verwendet. Es besteht aus 51 Aminos\u00e4uren, die zwei Ketten, A und B, bilden, und enth\u00e4lt 3 Disulfidbindungen. Zwei S-S-Bindungen zwischen den Ketten, die die Ketten A und B verbinden, und eine S-S-Bindung innerhalb der Kette, die sich in der Kette A befindet.<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/10\/chains.jpg\"><img decoding=\"async\" class=\"wp-image-10211 alignnone size-full lazyload\" data-src=\"https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/10\/chains.jpg\" alt=\"\" width=\"401\" height=\"73\" data-srcset=\"https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/10\/chains.jpg 401w, https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/10\/chains-300x55.jpg 300w\" data-sizes=\"(max-width: 401px) 100vw, 401px\" src=\"data:image\/svg+xml;base64,PHN2ZyB3aWR0aD0iMSIgaGVpZ2h0PSIxIiB4bWxucz0iaHR0cDovL3d3dy53My5vcmcvMjAwMC9zdmciPjwvc3ZnPg==\" style=\"--smush-placeholder-width: 401px; --smush-placeholder-aspect-ratio: 401\/73;\" \/><\/a><\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/10\/bond-reduction-graph.jpg\"><img decoding=\"async\" class=\"wp-image-10212 alignnone size-full lazyload\" data-src=\"https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/10\/bond-reduction-graph.jpg\" alt=\"\" width=\"537\" height=\"201\" data-srcset=\"https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/10\/bond-reduction-graph.jpg 537w, https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2021\/10\/bond-reduction-graph-480x180.jpg 480w\" data-sizes=\"(min-width: 0px) and (max-width: 480px) 480px, (min-width: 481px) 537px, 100vw\" src=\"data:image\/svg+xml;base64,PHN2ZyB3aWR0aD0iMSIgaGVpZ2h0PSIxIiB4bWxucz0iaHR0cDovL3d3dy53My5vcmcvMjAwMC9zdmciPjwvc3ZnPg==\" style=\"--smush-placeholder-width: 537px; --smush-placeholder-aspect-ratio: 537\/201;\" \/><\/a><\/p>\n<p>Eine fast vollst\u00e4ndige Reduktion aller drei S-S-Bindungen in Insulin wurde mit dem ROXY EC System up-front MS erreicht.<\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][et_pb_column type=&#8220;1_3&#8243; _builder_version=&#8220;4.4.8&#8243; custom_padding=&#8220;5%|5%|||false|false&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220; custom_padding__hover=&#8220;|||&#8220;][et_pb_image src=&#8220;https:\/\/antecscientific.com\/wp-content\/uploads\/2020\/12\/disulfide_bond_reduction.png&#8220; title_text=&#8220;disulfid_bindung_reduktion&#8220; _builder_version=&#8220;4.7.7&#8243; _module_preset=&#8220;default&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;][\/et_pb_image][et_pb_text _builder_version=&#8220;4.7.7&#8243; _module_preset=&#8220;default&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;]<\/p>\n<p><em>Das Aufbrechen einer Disulfidbindung in einem elektrochemischen Durchflussreaktor erfordert ein Potenzial von etwa -1 V.<\/em><\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][\/et_pb_row][\/et_pb_section][et_pb_section fb_built=&#8220;1&#8243; admin_label=&#8220;Download Table&#8220; _builder_version=&#8220;4.5.6&#8243; background_enable_color=&#8220;off&#8220; use_background_color_gradient=&#8220;on&#8220; background_color_gradient_start=&#8220;#f6f9fb&#8220; background_color_gradient_end=&#8220;#ffffff&#8220; background_color_gradient_start_position=&#8220;50%&#8220; max_width_tablet=&#8220;&#8220; max_width_phone=&#8220;100%&#8220; max_width_last_edited=&#8220;on|desktop&#8220; module_alignment=&#8220;center&#8220; custom_margin=&#8220;0px||0px||false|false&#8220; custom_padding=&#8220;40px||40px||false|false&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;][et_pb_row _builder_version=&#8220;4.5.6&#8243; background_color=&#8220;rgba(0,0,0,0)&#8220; width_tablet=&#8220;&#8220; width_phone=&#8220;&#8220; width_last_edited=&#8220;on|phone&#8220; max_width=&#8220;80%&#8220; max_width_tablet=&#8220;&#8220; max_width_phone=&#8220;&#8220; max_width_last_edited=&#8220;on|phone&#8220; module_alignment=&#8220;center&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;][et_pb_column type=&#8220;4_4&#8243; _builder_version=&#8220;4.5.6&#8243; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;][et_pb_text admin_label=&#8220;Shortcode of Table&#8220; _builder_version=&#8220;4.5.8&#8243; background_color=&#8220;#ffffff&#8220; custom_padding=&#8220;20px|30px|30px|30px|false|false&#8220; custom_padding_tablet=&#8220;&#8220; custom_padding_phone=&#8220;|0px||0px|false|false&#8220; custom_padding_last_edited=&#8220;on|phone&#8220; box_shadow_style=&#8220;preset1&#8243; box_shadow_blur=&#8220;40px&#8220; box_shadow_color=&#8220;rgba(0,33,91,0.17)&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;]<\/p>\n<p>[wpfd_category id=&#8220;25&#8243;]<\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][\/et_pb_row][\/et_pb_section]<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>ROXY-Reaktoren f\u00fcr die Reduktion von Disulfidbindungen Schnelle und sanfte Reduktion Ersetzen von (harter) Nasschemie Keine Gefahr der Ionenunterdr\u00fcckung \u00dcberlegene S-S-Anleiheabtretung Disulfidbindungen sind eine der wichtigsten posttranslationalen Modifikationen von Proteinen. 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